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講少少技術野
如果DNA樣本夠純,就算濃度勁低都真係有方法靠PCR copy到足夠檢測用的量
例如我用過一d高純度(濃度唔高) 的合成DNA樣本,真係將支針頭 (其實係pipette tip) 浸入去攪幾下,只係靠黏上去果少少DNA都做到
提純DNA方面,而家有好多工具都係針對低濃度樣本,其中一個方法(我用過) 就係加入大量垃圾tRNA(你當係DNA的類似物,身體入面都有的,功能唔同)﹐將你想要的DNA的比例降低,所以當提純果時,損失的DNA (一定有的)入面係你果d重要DNA的比例都會降低
簡單咁講,揾D垃圾tRNA做替死鬼,犧牲高濃度DNA黎換取減少損失
再靠高精確度的PCR去推返高想檢測果part的濃度
又學到野
sacrificial protection
但之後點分離返DNA 出嚟?
用Gel electrophoresis?
btw 你果d 應該係純淨既standard solution 先做到?
而頭髮、皮屑果d 都係好污糟既sample
講少少技術野
如果DNA樣本夠純,就算濃度勁低都真係有方法靠PCR copy到足夠檢測用的量
例如我用過一d高純度(濃度唔高) 的合成DNA樣本,真係將支針頭 (其實係pipette tip) 浸入去攪幾下,只係靠黏上去果少少DNA都做到
提純DNA方面,而家有好多工具都係針對低濃度樣本,其中一個方法(我用過) 就係加入大量垃圾tRNA(你當係DNA的類似物,身體入面都有的,功能唔同)﹐將你想要的DNA的比例降低,所以當提純果時,損失的DNA (一定有的)入面係你果d重要DNA的比例都會降低
簡單咁講,揾D垃圾tRNA做替死鬼,犧牲高濃度DNA黎換取減少損失
再靠高精確度的PCR去推返高想檢測果part的濃度
又學到野
sacrificial protection
但之後點分離返DNA 出嚟?
用Gel electrophoresis?
btw 你果d 應該係純淨既standard solution 先做到?
而頭髮、皮屑果d 都係好污糟既sample
題外話
其實run gel 真係可以用黎分離想要既DNA :^(
係跟果個figment 既size 黎分
要用一隻high resolution 既gel 黎 run
DNA之間既size 就算只係差幾個 base pair 都分到
個technique 叫做gel purification (無記錯既話)
係DNA cloning同埋multiplex PCR 入面經常用
⋯⋯不過好似唔關forensic 事 :^(
咁攞血液樣本,視乎個份量可以決定用棉花棒、棉花球,或者入落venoject tube(一種特別試管)度
:^(
之後要加一種叫EDTA 既防腐劑落去,防止血液樣本變壞
如果個樣本係有特別形態,例如一件沾血既衫,咁就應該成件包返實驗室
不過依種情況就要確保包完之後通風,避免變壞
正正因為luminol 既限制,所以要確定樣本係血液的話,就要另外再做測試
咁就簡單介紹下Takayama Test
(感覺好似方太教煮餸咁)
只需要將糖同pyridine 加入去樣本當中再稍微加熱,如果係血既話,顯微鏡一睇就會見到啡色羽毛狀既結晶
:^(
咁做得法證檢測就要肯定所有野
即使知道係血,都仲要知道血既來源
唔係既話我點知佢係豬紅定雞紅
依個時候,就要用到兔仔嚟做precipitin test
首先,捉隻兔仔
跟住打少少人血落隻兔仔度
咁兔仔既免疫系統就會對外來既人血排斥,然後兔仔既血清就會擁有對人血既抗體
之後就可以將兔仔血清同「未知來源既血」撈埋,咁好自然如果樣辦係人血,針對人血既抗體就會令人血痴埋一舊,形成一層白色野
:^(
正常情況,人入面所有細胞都有一樣的DNA﹐不過部分白血球入面的DNA其實會經過修改,有少少分別
同埋,以前有非香港的案例,有人以為自己綠帽左,去驗DNA
先知道佢未出世果時,同佢的一個異卵雙胞胎融合左 (我都唔太理解點解可以咁)
佢身體有兩個人的DNA﹐之後佢生左個同自己冇血緣的仔
咁樣算唔算 :^(
乜可以一個人兩份DNA :^( :^(
仲要唔會排斥先好野
btw 白血球DNA 經過修改係因為記憶細胞要記得d 新既病菌抗原?
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正常情況,人入面所有細胞都有一樣的DNA﹐不過部分白血球入面的DNA其實會經過修改,有少少分別
同埋,以前有非香港的案例,有人以為自己綠帽左,去驗DNA
先知道佢未出世果時,同佢的一個異卵雙胞胎融合左 (我都唔太理解點解可以咁)
佢身體有兩個人的DNA﹐之後佢生左個同自己冇血緣的仔
咁樣算唔算 :^(
乜可以一個人兩份DNA :^( :^(
仲要唔會排斥先好野
btw 白血球DNA 經過修改係因為記憶細胞要記得d 新既病菌抗原?
如果佢有兩份dna咁點解判斷佢個仔同佢無血緣
或者咁問 點判斷兩份dna邊份先係佢嘅
講少少技術野
如果DNA樣本夠純,就算濃度勁低都真係有方法靠PCR copy到足夠檢測用的量
例如我用過一d高純度(濃度唔高) 的合成DNA樣本,真係將支針頭 (其實係pipette tip) 浸入去攪幾下,只係靠黏上去果少少DNA都做到
提純DNA方面,而家有好多工具都係針對低濃度樣本,其中一個方法(我用過) 就係加入大量垃圾tRNA(你當係DNA的類似物,身體入面都有的,功能唔同)﹐將你想要的DNA的比例降低,所以當提純果時,損失的DNA (一定有的)入面係你果d重要DNA的比例都會降低
簡單咁講,揾D垃圾tRNA做替死鬼,犧牲高濃度DNA黎換取減少損失
再靠高精確度的PCR去推返高想檢測果part的濃度
又學到野
sacrificial protection
但之後點分離返DNA 出嚟?
用Gel electrophoresis?
btw 你果d 應該係純淨既standard solution 先做到?
而頭髮、皮屑果d 都係好污糟既sample
題外話
其實run gel 真係可以用黎分離想要既DNA :^(
係跟果個figment 既size 黎分
要用一隻high resolution 既gel 黎 run
DNA之間既size 就算只係差幾個 base pair 都分到
個technique 叫做gel purification (無記錯既話)
係DNA cloning同埋multiplex PCR 入面經常用
⋯⋯不過好似唔關forensic 事 :^(
我睇書都係話用gel electrophoresis 分DNA
正常情況,人入面所有細胞都有一樣的DNA﹐不過部分白血球入面的DNA其實會經過修改,有少少分別
同埋,以前有非香港的案例,有人以為自己綠帽左,去驗DNA
先知道佢未出世果時,同佢的一個異卵雙胞胎融合左 (我都唔太理解點解可以咁)
佢身體有兩個人的DNA﹐之後佢生左個同自己冇血緣的仔
咁樣算唔算 :^(
乜可以一個人兩份DNA :^( :^(
仲要唔會排斥先好野
btw 白血球DNA 經過修改係因為記憶細胞要記得d 新既病菌抗原?
如果佢有兩份dna咁點解判斷佢個仔同佢無血緣
或者咁問 點判斷兩份dna邊份先係佢嘅
嘩,呢個應該係哲學問題,self identity :^(
我估應該唔係50%: 50%咁mix﹐可能用一開始揾到果set DNA當係佢,之後奇怪地揾到多一set DNA先發現
btw 即使去到今日 test 人血都仲係用緊兔仔抗體
今年年中法證事務部都出過post 請人餵飼兔仔
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講少少技術野
如果DNA樣本夠純,就算濃度勁低都真係有方法靠PCR copy到足夠檢測用的量
例如我用過一d高純度(濃度唔高) 的合成DNA樣本,真係將支針頭 (其實係pipette tip) 浸入去攪幾下,只係靠黏上去果少少DNA都做到
提純DNA方面,而家有好多工具都係針對低濃度樣本,其中一個方法(我用過) 就係加入大量垃圾tRNA(你當係DNA的類似物,身體入面都有的,功能唔同)﹐將你想要的DNA的比例降低,所以當提純果時,損失的DNA (一定有的)入面係你果d重要DNA的比例都會降低
簡單咁講,揾D垃圾tRNA做替死鬼,犧牲高濃度DNA黎換取減少損失
再靠高精確度的PCR去推返高想檢測果part的濃度
又學到野
sacrificial protection
但之後點分離返DNA 出嚟?
用Gel electrophoresis?
btw 你果d 應該係純淨既standard solution 先做到?
而頭髮、皮屑果d 都係好污糟既sample
題外話
其實run gel 真係可以用黎分離想要既DNA :^(
係跟果個figment 既size 黎分
要用一隻high resolution 既gel 黎 run
DNA之間既size 就算只係差幾個 base pair 都分到
個technique 叫做gel purification (無記錯既話)
係DNA cloning同埋multiplex PCR 入面經常用
⋯⋯不過好似唔關forensic 事 :^(
我睇書都係話用gel electrophoresis 分DNA
係可以咁做,不過應該係research用途居多
用高%gel去分DNA﹐之後係UV燈箱上面cut返果個純的fragment (通常係PCR product)﹐之後提純DNA﹐再拎去定序 (sequencing)
想再準d咪用PAGE (打直果種gel)﹐ 不過應該唔可以cut返個product出黎
其實唔駛分,因為而家提純DNA多數做法係用清潔劑爆哂所有cell﹐如果樣本真係好污糟,可以用離心機fing一次整走d沉澱物先
之後用柱色層 (column chromatography) 拎純DNA (呢個位有各式各樣的kit)
因為PCR的靈敏度夠高,只要係純DNA就ok﹐之後用電泳 (gel electrophoresis) 睇PCR product的DNA長度
即係前面講SNP的手法